ORF1ab et essai rapide SARS-COV-2 RT-QPCR d'ACP de gènes de N analysent la fluorescence triple

Analyse de SARS-COV-2 droite-qPCR (méthode triple de fluorescence RT-PCR), détection des gènes d'ORF1ab et de N du SRAS CoV 2

L'analyse de qPCR de SARS-COV-2 droite est (droite) un essai inverse en temps réel de l'amplification en chaîne par réaction du transcriptase (droite) (ACP) destiné à la détection qualitative des gènes d'ORF1ab et de N du SRAS CoV 2 dans l'écouvillon (NP) nasopharyngal, l'écouvillon (OP) oro-pharyngé et le spécimen de crachat rassemblés par un membre du personnel soignant, des patients suspectés de COVID-19 par leur fournisseur de soins de santé.

Caractéristiques

• De grande précision
• Limite de détection : 200 copies/mL
• Sensibilité : 100 %
• Spécificité : 99,1%
• Exactitude : 99,3%

Opération commode

les Triplex-détections dans une amorce et une sonde simples de tube (les gènes d'ORF1ab et de N, le gène humain de RNase P (RNP)) ont prémélangé la forme liquide

Fiable

• Système contre la pollution : UDG
• Contrôle interne : Gène humain de RNaseP (RNP)
• Contrôle positif : Pseudovirus

Rapide

Résultat dans environ 1 heure

INSTRUMENTS APPLICABLES :

Instrument en temps réel d'ACP avec des canaux de FAM, de TEXAS RED/ROX et de HEX/VIC, tels qu'ABI7500, ABI Q3, ABI Q6, bio rad CFX96.

Pneumonie nouvelle de syndrôme respiratoire aigu grave (coronavirusdisease2019, covid-19). l'infection sars-cov-2 est un problème global sérieux de santé publique qui a causé dans le monde entier des pertes économiques graves, menant l'Organisation Mondiale de la Santé (OMS) pour caractériser la manifestation sars-cov-2 comme urgence de santé publique de souci international.

Le criblage tôt des cas suspectés et de l'isolement et le traitement des patients atteints de sars-cov-2 sont principaux à commander la manifestation, car il n'y a aucune drogue ou vaccin spécifique disponible pour traiter la pneumonie de neocrown. Actuellement, l'étalon or pour le diagnostic de l'infection sars-cov-2 est la réaction en chaîne de reversetranscription-polymérase (droite-ACP). Depuis la sortie du génome complet de sars-cov-2, les laboratoires de santé publique, les laboratoires cliniques et les sociétés diagnostiques de différents countrys ont développé un grand choix de méthodes droite-ACP pour la détection sars-cov-2, visant différents gènes et régions genomic du génome viral (orf1ab, rdrp, n, e, etc.).

Cependant, la méthode droite-ACP a indiqué beaucoup d'inconvénients et de points faibles dans la pratique, particulièrement pendant les urgences de santé publique telles que la manifestation sars-cov-2 actuelle. les méthodes droite-ACP sont encombrantes pour exécuter et devoir être exécutées sur des instruments d'ACP par les techniciens de laboratoire professionnels qualifiés.

Ceci le rend difficile de satisfaire la demande de l'essai sur place, et pour des contrées lointaines ou des hôpitaux primaires avec les ressources limitées, des échantillons doivent être transportés à un hôpital de plus haut niveau avec des moyens des tests droite-ACP pour l'essai. C'est non seulement long mais augmente également le risque d'exposition de virus. En outre, le droite-ACP pour l'essai sars-cov-2 pendant la pandémie covid-19 a produit un taux élevé de faux négatif (30-50%) pour un certain nombre de raisons, qui demeure un problème non-négligeable.

La réaction en kit d'ADN d'épingle à cheveux catalytique (catalytichairpinassembly, cha) est un système acide nucléique sans enzyme isotherme d'amplification de signal. Deux ensembles de sondes monocatenaires complémentaires d'ADN avec une structure d'épingle à cheveux sont conçus basés sur le fragment d'ARN de cible étant détecté. Quand le fragment de cible n'est pas présent, les deux ensembles d'ADN monocatenaire sont présents dans une structure d'épingle à cheveux.

Quand le fragment d'ARN de cible est présent dans le système, les deux ensembles de sondes monocatenaires d'ADN avec la structure d'épingle à cheveux ouvriront la structure d'épingle à cheveux à leur tour et formeront un double brin d'ADN sous l'effet catalytique de l'ARN de cible. Le processus catalytique entier ne consomme pas le fragment d'ARN de cible, et le fragment d'ARN de cible invite les deux ensembles de sondes monocatenaires d'ADN pour former une double mèche avant la continuation au prochain Round de la réaction, de ce fait créant l'amplification de signal. En conclusion, la détection du fragment d'ARN de cible est réalisée en détectant la sonde bicaténaire d'ADN.